АКЦИЯ! 2 упаковки по цене одной! ВАЖНО! Криомелт МН показан для профилактики и лечения вирусных заболеваний. Особенно Криомелт МН эффективен при первых признаках заражения, что крайне актуально, учитывая сложившуюся эпидемиологическую ситуацию с коронавирусом. Позаботьтесь о себе и близких!

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ИНСТИТУТ ТОКСИКОЛОГИИ

193019,Санкт-Петербург, ул. Бехтерева 1
Телефон;256-06-80
Телефакс:567-55-66
"УТВЕРЖДАЮ"
Директор Института токсикологии
Минздрава Российской Федерации,
доктор мед. наук, профессор
А.Н. Петров
2000 г.
ОТЧЕТ об экспериментальном исследованииострой токсичности препарата «WN-криомелт» (промежуточный)

Научныйруководитель А.Б. Космачев доктор медицинских наук
Санкт-Петербург, 2000 г.
СПИСОК ИСПОЛНИТЕЛЕЙ
Ведущий,научи, сотрудник, канд. мед. Наук (ответственный исполнитель) М.К. Шевчук
Ведущийнаучн. сотрудник, В.К. Суханкин канд. мед. наук
Ведущийнаучн. сотрудник, С.Е. Колбасов канд. мед. наук
Научн.Сотрудник М.В. Мелихова
Старшийнаучн. Сотрудник В.В. Трефилов
Ведущийнаучн. сотрудник, Г.С. Стройкова канд. мед. наук
Научныйсотрудник О.И. Болотникова
Работу обеспечивали
Лаборанты-исследователи:Л.М. Пименова, Л.Н. Алпатова, С.Ю. Пилипяк
Ветеринарныйврач Е.Г. Потапенко
РЕФЕРАТ
Отчет изложен на 19 страницах текста, содержит 8 таблиц ивключает 8 библиографических ссылок. В отчете представлены результатыисследований острой токсичности препарата «WN-криомелт» при его внутривенном ивнутримышечном введении лабораторным животным — грызунам (белым мышам, крысам)и негрызунам (беспородным собакам)
Ключевые слова: препарат «WN-криомелт»; острая токсичность; крысы; мыши;собаки; внутривенное введение; внутримышечное введение.
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ
1. Материалы иметоды
1.1. Животные и их содержание
1.2. Постановка исследования
2. Результатыисследования
2.1. Мыши и крысы
2.1.1. Переносимость при остром применении препарата
2.1.2. Данныевскрытия (некропсии
2.1.3. Резюме по исследованию острой токсичности на грызунах
2.2. Эксперименты на собаках
2.2.1. Переносимость при остром применении препарата
2.2.2. Данныевскрытия (некропсии)
2.2.3. Резюме по исследованию острой токсичности на собаках
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ЛИТЕРАТУРА
ВВЕДЕНИЕ
Препарат «WN-криомелт» разработан 000 «МП Северная пчела» (СанктПетербург) и предназначен для лечения поражений печени(гепатитов, циррозов).
Представляет собой нативный раствор меда в воде,приготовленный по оригинальной запатентованной технологии.
Препарат вводится внутримышечно 1 раз в3 дня по 1 мл в течение 1 месяца.
Для выпуска препарата как лекарственного средства, разрешенногок применению
в клинике, требуется проведение комплекса испытаний попрограмме, утвержденной
Государственным Фармакологическим комитетом России, которая,в частности, предусматривает изучение острой токсичности препарата не менеечем на трех видах экспериментальных животных.
Целью настоящего исследования было изучение остройтоксичности препарата «WN—криомелт» на белых лабораторных мышах, крысах ибеспородных собаках при внутримышечном и пероральном путях введения.
ОСНОВНАЯЧАСТЬ
1- МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
1.1. Животные и их содержание
Эксперименты по исследованию острой токсичности выполнялисьна белых нелинейных мышах, крысах и беспородных собаках обоего пола.
1. Крысы и мыши поступили из питомника Рапполово,Санкт-Петербург. Возраст крыс 3.5 месяца, масса 150-170 г. Возраст мышей 2-2.5мес., масса 18-20 г.
2. Собаки поступили из зоокомбината Санкт-Петербурга.Возраст 3-4 года, масса 8-16 кг.
КАРАНТИН
Длительность карантина (акклиматизационного периода) длявсех животных составляла четырнадцать (14) дней. В течение карантинапроводили ежедневный осмотр каждого животного (поведение и общее состояние),дважды в день животных наблюдали в клетках (заболеваемость и смертность). Передначалом исследования животные, отвечающие критериям включения в эксперимент,были распределены на группы с помощью метода рандомизации. Животные, несоответствующие критериям, были исключены из исследования в течение карантина.
СОДЕРЖАНИЕ МЫШЕЙ и КРЫС
Клетки с животными были помещены в отдельные комнаты.Световой режим:
12 час — свет, 12 час — темнота. Температура воздухаподдерживалась в пределах 19-25°С, относительная влажность — 50-70%.Температура и влажность воздуха регистрировались ежедневно. При изменениипогодных условий контролировался воздухообмен в помещении с помощью анемометраи путем измерения содержания в воздухеуглекислого газа и аммиака. Былустановлен режим проветривания, обеспечивающий около 15 объемов помещения вчас, концентрацию СО2 не более 0.15 объемных %, аммиака — не более0.001 мг/л.
СОДЕРЖАНИЕ СОБАК
Собаки находились в будках и вольерах, расположенных внепомещения. Контроль температуры, влажности воздуха и воздухообмена непроводился.
1.2. Постановка исследования
Для определения показателей острой токсичности препарата «WN—криомелт» у мышей и крыс использовались группы по 5 животных одногопола. Кроме того, имелись аналогичные по численности группы контрольных животныхкаждого пола. Животные распределялись по группам случайным образом. Вкачестве критерия приемлемости рандомизации считали отсутствие внешних признаковзаболеваний и гомогенность групп по массе тела (± 20%). Для определения показателей острой токсичности препарат «WN-криомелт» вводили белым крысам и мышам обоего пола внутримышечно (в/м) иперорально (п/о) в возрастающих дозах (точность дозирования достигаласьизменением объема вводимого препарата) по Литчфилду-Уилкоксону. Для достижениябольших доз препарата его вводили животным повторно с интервалами 30 минут втечение 2-3 часов (до 6 повторных введений). В/м введение осуществляли в мышцыбедра (в обе лапы). Пероральное введение производилось через металлическийатравматический зонд. Контрольным животным вводились аналогичные максимальныеобъемы бидистиллированной воды (по 6 введений). При исследовании острой токсичности на собаках использовались 2 беспородные собаки — самец и самка — каждая из которых получила внутримышечно в общей сложности по 12 мл/кг препарата (за 6 введений с интерваломв 40 мин). Две контрольные собаки по такой же схеме получили аналогичныеобъемы бидистиллированной воды.
Период последующего наблюдения и угрызунов, и у собак составил 14 дней.
РЕГИСТРИРУЕМЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ
И грызуны, и собаки наблюдались 14 дней. Регистрироваликлинические симптомы интоксикации, показатели общего состояния. До началаэксперимента, а также на 2, 7 и 14 дни производилось взвешивание, учетпотребления корма и воды (крысы помещались в обменные клетки итальянской фирмы«Техnорlаst»; учет потребления воды и пищисобаками осуществлялся путем регистрации количества потребляемого корма ижидкости).
Через 14 дней животные всех экспериментальных групп былиподвергнуты эфтаназии (мыши и крысы — передозировкой эфира, собаки —передозировкой гексенала) и подвергнуты патоморфологическому исследованию.
2- РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Мыши и крысы
2.1.1. Переносимость при остром применении препарата
Но в одном из случаев летальных эффектов достичь не удалосьдаже при введении максимальных доз: 30 мл/кг при внутримышечном и 42 мл/кг припероральном введении. Также не отмечалось значимых нарушений общего состоянияи поведения животных. Отмечавшаяся некоторая заторможенность и снижениепотребления корма в первые и следующие сутки имели место и в контрольной группеживотных, и связаны, по всей видимости, не с токсическим действием препарата, асо стрессирующим эффектом процедуры многократного перорального введения большихобъемов.
Во все дни наблюдения по общему состоянию и поведениюопытные животные не отличались от контрольных.
Динамика массы тела во всех группах оставалась нормальной. В Таблицах 2.1.1.1
и 2.1.1.2 приведены данные по измерению массы тела животныхпо всех экспериментальных группах.
Таблица2.1.1.1
Динамика массы тела переживших интоксикацию мышей (г, М ± т)после острого введения препарата «WN-криомелт»
Время наблюдения Исследуемыегруппы и пол
Внутримышечное введение

 

Контроль

WN-криомелт

 

M

F

M

F

Фон

20.4±0.6

19.3±0.6

19.4±0.4

19.0±0.5

2-й день

20.0±0.6

19.1±0.7

19.2±0.7

18.2±0.7

7-й день

21.1±0.5

20.0±0.5

19.8±1.0

19.0±1.1

14-й день

21.7±0.6

20.7±0.6

21.2±0.б

20.5±0.9

Пероральное введение

 

Контроль

WN-криомелт

 

M

F

M

F

Фон

19.3±0.6

18.8±0.3

20.1±0.2

19.3±0.3

2-й день

19.3±0.5

18.5±0.5

20.1±0.5

18.9±0.8

7-й день

20.6±0.7

19.5±0.2

20.9±0.4

20.4±0.б

14-й день

21.3±0.8

21.7±0.5

21.4±0.4

20.9±0.5

Таблица2.1.2.2
Динамика массы тела пережившихинтоксикацию крыс (г, М± m) после острого введения препарата «WN-криомелт»
Время наблюдения Исследуемыегруппы и пол
Внутримышечное введение

 

Контроль

WN-криомелт

 

M

F

M

F

Фон

177 ±4

175 ±5

172 ±5

167 ±3

2-й день

175 ±5

171 ±6

170 ±4

168 ±4

7-й день

182 ±4

176 ±5

177 ±3

170 ±5

14-й день

185 ±4

183 ±5

180 ±4

178 ±4

Пероральное введение

 

Контроль

WN-криомелт

 

M

F

M

F

Фон

170 ±3

172 ±5

168 ±4

171 ±5

2-й день

171 ±4

172 ±4

170 ±4

172 ±4

7-й день

175 ±5

172 ±6

174 ±5

177 ±5

14-й день

178 ±4

182 ±6

181 ±4

185 ±4

Из таблиц видно, что на второй день исследования отмечалась некоторая потеря массы тела у животных всех групп, в том числе и контрольной.Чтобы исключить этот эффект (вызванный, по-видимому, стрессом, связанным спомещением животных в обстановку исследований), сравнивались изменения веса поотношению к фоновым показателям. Анализ данных не выявил каких-либо достоверных различий вдинамике массы тела между опытными и контрольными животными. Несколькобольший прирост массы тела у животных опытных групп по сравнению сконтрольными к концу исследования не носил статистически достоверного характера и имелхарактер лишь тенденции.
2,1.2. Данные вскрытия (некропсии)
Животные всех экспериментальных групп были подвергнутыэфтаназии передозировкой эфира в конце исследования (через 14 дней). При макроскопическом исследовании видовых и половых отличий,а также влияния пути введения на состояние внутренних органов неустановлено. Шерсть как мышей, так и крыс имела опрятный вид, былаблестящей, без очагов облысения. Питание животных было удовлетворительным. Кожа и подкожная клетчатка в месте введения препаратаизменений не представляли. Инфильтратов, раздражения или некроза тканей в местевведения не наблюдалось. При осмотре грудной и брюшной полостей нарушений врасположении внутренних органов не отмечалось. Подчелюстные лимфатические узлы и слюнные железы имелиовальную или округлую форму, однородный розоватый или желтоватый цвет иумеренную лотность. Щитовидная железа плотно прилежала к гортани, имела обычныеразмеры и плотность, розовато-красноватый цвет. Тимус имел треугольнуюформу, беловатый цвет и умеренно плотную консистенцию. Величина и форма сердца изменений не представляли. Мышца сердца была коричневатой, плотной. Поверхность легких имела бледно-розовую окраску; легкиеспадались при вскрытии грудной клетки. Ткань на разрезе также имела однороднуюбледно-розовую окраску. Слизистая оболочка внелегочных бронхов была гладкой,блестящей, бледнорозовой. Желудок имел обычную форму и размеры, просвет был заполненплотным пищевым содержимым. Слизистая тела желудка была бледно-розовой,блестящей, складчатой. Слизистая тонкой и толстой кишки была блестящей,гладкой. Величина и форма печени изменений не представляли. Капсулапечени была тонкой, прозрачной. Ткань печени имела коричневатый цвет иумеренно плотную консистенцию.Поджелудочная железа былабледно-розовой, дольчатой. Величина и форма почек не отличались от контроля, капсулалегко снималась. Поверхность органа была гладкой, однороднойкоричневато-сероватой окраски. На разрезе почек отчетливо различались корковое и мозговоевещество. Форма, размеры и плотность надпочечников, яичников или яичекне отличались от обычных. Селезенка имела темно-вишневый цвет, гладкую поверхность иплотноватую консистенцию. Оболочки головного мозга были тонкими, прозрачными. Веществоголовного мозга имело умеренную плотность. Расширения желудочков мозга ненаблюдалось.Массовые коэффициенты внутренних органов животных,получавших препарат, а также контрольных животных, приведены в таблицах 2.1.3.1(мыши) и 2.1.3.2 (крысы). В таблицах приведены данные по животным, получавшимвысокие дозы препарата (более 15 мл/кг при в/м и 20 мг/кг при п/о введении). Статистически достоверного изменения относительной массыкаких-либо внутренних органов не отмечается. Таким образом через 2 недели после острого введенияпережившие интоксикацию животные не отличались по этим показателям от животных контрольныхгрупп (данные по обоим контрольным группам для двух путей введенияобъединены).
Таблица 2.1.3.1
Массовый коэффициент (МК) органов у белых мышей послевведения высоких доз препарата «WN-криомелт»
Экспериментальная группа и пол

 

Контроль

В/м

П/о

Исследуемые показатели

M

F

M

F

M

F

Сердце

3.7±0.4

3.8±0.2

3.5±0.4

3.7±0.4

3.6±0.1

3.8±0.2

Легкие с трахеей

6.6±0.2

6.7±0.3

6.5±0.2

6.5±0.2

6.7±0.3

б.6±0.1

Тимус

0.95±0.12

1.02±О,11

0.95±0.12

0.89±0.11

1.02±0.09

1.01±О.11

Печень

38.4±2.8

38.9±3.0

37.5±2.6

39.1±2.7

38.5±2.9

38.6±2.9

Селезенка

3.74±0.40

3.8±043

3.73±0.39

3.78±0.38

3.7б±0.42

3.77±0.43

Почки

10.0±1.1

10.6±0.8

10.0±1.0

10.2±1.1

10.5±0.6

10.3±0.6

Надпочечники

0.17±0.04

0.15±0.06

0.15±0.03

0.16±0.04

0.14±0.06

0.1З±0.04

Головной мозг

16.2±2.4

17.1±1.8

15.7±2.2

15.9±2.4

16.5±1.7

16.4±1.6

Яички или яичники

4.2±0.3

0.28±0.05

4.0±0.1

0.27±0.04

4.0±0.1

0.28±0.05

Таблица 2.1.3.2
Массовый коэффициент (МК) органов у белых крыс послевведения высоких доз препарата «WN-криомелт»

 

Контроль

В/м

П/о

Исследуемые показатели

M

F

M

F

M

F

Сердце

4.4±0.3

4.2±0.5

4.5±0.5

4.6±0.3

4.3±0.2

4.4±0.5

Легкие с трахеей

6.5±0.1

6.7±0.8

7.2±0.3

7.4±0.8

6.7±0.4

6.5±0.8

Тимус

1.3±0.4

1.4±0.2

1.2±0.2

1.4±0.1

1.4±0.3

1.4±0.2

Печень

29.3±1.7

28.6±2.3

32.8±1.4

30.4±2.7

29.4±2.6

28.5±1.8

Селезенка

5.2±0.3

5.4±0.4

6.0±0.5

5.6±0.4

5.2±0.4

5.7±0.6

Почки

7.6±0.3

7.4±0.5

7.5±0.2

7.5±0.5

7.6±0.4

7.5±0.3

Надпочечники

0.10±0.04

0.10±0.02

0.10±0.03

0.08±0.01

0.11±0.03

0.10±0.05

Головной мозг

8.6±0.6

8.5±0.5

8.7±0.3

8.8±0.2

8.3±0.1

8.4±0.5

Яички или яичники

7.21±0.3

0.32±0.04

7.19±0.21

0.36±0.05

7.36±0.42

0.33±0.08

2.1.3. Резюме по исследованию остройтоксичности на грызунах
Исследование острой токсичности на грызунах — нелинейныхбелых мышах и крысах — показало, что препарат «^Т^-криомелт» по параметрамострой токсичности относится к практически нетоксичным веществам. Об этомсвидетельствуют следующие экспериментальные данные:
Значения ЛД50 препарата «WN-криомелт» длябеспородных белых мышей и крыс обоего пола при внутримышечном введениинаходятся заведомо выше 30 мл/кг, что в сотни раз больше максимальной суточнойдозы для человека 1.0 мл (0.02 мл/кг); при пероральном введении грызунам значенияЛД5о препарата лежат выше 42 мл/кг.
Препарат «WN-криомелт» при его остром в/м введении в дозахдо 30 мл/кг и при п/о введении в дозах до 42 мл/кг беспородным белым мышам икрысам обоего пола не приводил к гибели животных, не вызывал макроскопических изменений головного мозга, внутренних иэндокринных органов, не вызывал гиперволемического отека внутренних органов,что подтверждается величинами их массовых коэффициентов;
При в/м введении препарата «WN-криомелт» во всехисследованных дозах не отмечалось образования инфильтратов, признаковгиперемии, эрозий или некрозов, свидетельствующих о раздражающем действиипрепарата на кожу, подкожную клетчатку и мышцы в месте введения; при п/овведении не отмечалось раздражающего действия на слизистые органов ЖКТ.
2.2. Эксперименты на собаках
Эксперимент был проведен на двухбеспородных собаках — самце (10.3 кг) и самке (9.5 кг). Препарат вводился внутримышечно всуммарной дозе 12 мл/кг (6 введений с интервалом 30-60 мин по 2 мл/кг).Животные контрольной группы (самец и самка) получили эквивалентные объемырастворителя — бидистиллированной воды — по такой же схеме введения.
Животные наблюдались в течение 2 недельс начала эксперимента. Летальных эффектов не отмечалось. Через 2 недели опытныеи контрольные животные были забиты передозировкой гексенала и подвергнутывскрытию и патоморфологическим исследованиям.
2.2.1. Переносимость при остромприменении препарата
У всех экспериментальных животных впервые сутки отмечались встревоженность, подавленное состояние, отказ от корма,что, скорее всего, объясняется стрессом, связанным с массированнымивнутримышечными инъекциями. На следующие сутки состояние и поведение животныхнормализовалось.
На протяжении всего исследования общее состояние и поведениеопытных животных не отличалось от таковых у контрольных собак. Данные, характеризующие динамику массытела, потребление воды и корма животными приведены в таблицах 2.2.1.1-2.2.1.3. Приведенные в таблицах данныепоказывают, что в первые сутки потребление корма животными обеих групп былосниженным (животные отказывались от пищи, но уже к вечеру они начали естьснова). В последующие сутки потребление пищи даже возросло, а в дальнейшем неотличалось от обычного. Каких-либо заметных изменений в массе тела ипотреблении воды не отмечалось.
Таблица2.2.1.1
Динамика массытела собак (кг) после введения препарата «WN-криомелт»

Животные

Пол

Дни наблюдения

 

 

Фон

2

7

14

Контроль

M

8.1

8.1

8.3

8.3

 

F

10.1

9.9

10.1

10.2

WN-криомелт

M

10.3

10.1

10.3

10.6

 

F

9.5

9.9

10.0

10.2

Таблица2.2.1.2
Динамика потребления воды (л/день)собаками после введения препарата «WN-криомелт»

Животные

Пол

Дни наблюдения

 

 

Фон

1

2

7

14

Контроль

M

0.50

0.30

0.55

0.50

0.50

 

F

0.60

0.35

0.55

0.55

0.55

WN-криомелт

M

0.50

0.50

0.50

0.50

0.55

 

F

0.60

0.45

0.60

0.55

0.60

Таблица2.2.1.З
Динамика потребления корма (г/сутки) собаками после введения препарата «WN-криомелт»

Животные

Пол

Дни наблюдения

 

 

Фон

1

2

7

14

Контроль

M

360

250

360

350

400

F

380

200

300

370

370

WN-криомелт

M

360

240

430

380

390

F

350

120

360

370

350

2.2.2. Данные вскрытия (некропсии)

При наружном осмотре установлено, чтособаки правильного телосложения, удовлетворительного питания. Выделений изестественных отверстий не обнаружено. Шерсть блестящая, опрятного вида, очаговоблысения не определяется. Зубы сохранены. Видимые слизистые оболочки бледнойокраски, блестящие. Молочные железы самок без уплотнений на ощупь, выделения изсосков отсутствовали. Половые органы самцов развиты правильно. Деформации илиотека конечностей нет. Изменений, раздражений, гиперемии кожи, подкожнойклетчатки в месте введения не наблюдалось.
Грудная и брюшная полости выпота несодержали. Положение внутренних органов грудной и брюшной полостей нарушений непредставляло. Париетальный и висцеральный листки плевры и брюшины были тонкие,блестящие, гладкие. Лимфатические узлы сероватого цвета, округлой формы, сгладкой поверхностью и плотной беловатой капсулой. Между собой и с подлежащимитканями узлы не спаяны. Слюнные железы овальной формы, желтоватого цвета,умеренно плотные, на разрезе — зернистого вида.
Щитовидная железа розовато-красногоцвета, обычной величины и формы, умеренно плотной консистенции. Тимуспредставлял собой плоское образование, бледного, чуть розоватого цвета, лежащеесреди жировой ткани переднего средостения у рукоятки грудины. Размеры иплотность изменены не были.
Интима аорты гладкая, блестящая,беловатого цвета. Диаметр аорты не изменен. Листки перикарда тонкие, блестящие,гладкие. Величина и форма сердца изменений не представляют. Левый желудочексокращен, в правом содержатся темно-красные сгустки и жидкая кровь. Клапанысердца тонкие, блестящие, гладкие. Мышца сердца на разрезе однороднойкоричневой окраски, умеренно плотная.
Просвет трахеи и крупных бронхов неизменен, слизистая оболочка блестящая, гладкая, бледного цвета. Легкиевоздушные, без уплотнений на ощупь, бледно-розовой окраски.
Слизистая пищевода блестящая, гладкая,бледного цвета. Желудок обычной величины и формы. Заполнен пищевым содержимым.Слизистая оболочка желудка складчатая, блестящая, бледного цвета. Слизистаяоболочка 12-перстной кишки бледно-розового цвета, гладкая, блестящая. Слизистаяоболочка тонкого кишечника бледно-розового цвета, блестящая, гладкая. Слизистаяоболочка толстой кишки сероватого цвета, блестящая, гладкая.
Форма и величина печени изменений непредставляли. Поверхность печени гладкая, однородной темно-красной окраски,капсула тонкая, прозрачная. Ткань печени на разрезе полнокровная, умеренноплотная.
Поджелудочная железа обычной формы ивеличины, умеренной плотности, беловатой, чуть розовой окраски, дольчатая.
Селезенка обычной формы,темно-вишневого цвета, умеренно плотной консистенции, с морщинистой капсулой.На разрезе на темно-красном фоне селезенки видны мелкие сероватого цветафолликулы. Величина и форма почек не изменены.
Поверхность почек коричневатого цвета,гладкая, капсула плотная, беловатого цвета, легко снимаемая. На разрезе органахорошо различимы корковое и мозговое вещество. Надпочечники овальной формы, беловатогоцвета, обычных размеров и плотности.
Мочевой пузырь заполнен небольшимколичеством прозрачной мочи. Слизистая оболочка пузыря складчатая, блестящая,бледной окраски.
Тело матки самок умеренно плотнойконсистенции, форма и размеры не изменены, слизистая оболочка труб бледная,блестящая, гладкая. Яичники обычной величины и плотности, с неровнойповерхностью сероватого цвета. Яички самцов беловатого цвета, обычных размерови плотности, поверхность разреза зернистая, однородной бледной окраски. Капсулаплотная, непрозрачная.
Твердая мозговая оболочка головногомозга плотная, беловатого цвета, снимается легко, сращений с веществом мозганет. Вещество мозга обычной плотности. Борозды и извилины головного мозгахорошо выражены. На фронтальных разрезах мозга отчетливо выделяются серое ибелое вещество. Желудочки мозга обычной величины, расширения нет.
Значения массовых коэффициентов внутренних органов всехсобак, использованных в эксперименте, приведены в таблице 2.2.2.1.
Как можно видеть, каких-либо существенныхотклонений значений массовых коэффициентов от видовой нормы, которые бы можнобыло расценить как результат острого токсического действия препарата «WN-криомелт», не обнаруживается.
h2.2.3. Резюме по исследованию остройтоксичности на собаках
Таким образом, результаты исследованияострой токсичности на собаках показали, что:
Острое внутримышечное введение препарата «WN-криомелт» в дозе 12 мл/кг (6 введенийпо 2 мл/кг) беспородным собакам обоего пола не приводило к гибели животных, неоказывало каких-либо существенных нарушений их общего состояния и поведения, неприводило к патологическим изменениям головного мозга, внутренних и эндокринныхорганов и не оказывало раздражающего действия на органы ЖКТ, что подтверждаетсяданными некропсии и макроскопического исследования.
Таблица2.2.2.1
Массовые коэффициенты (МК, г/1 кг весатела) органов собак при внутримышечном введении препарата «WN-криомелт»

Орган

Исследуемыегруппы и пол

Контроль

WN-криомелт

M

F

M

F

Сердце

115,0
6,3

112,0
7,1

105,0
6,9

112,0
6,4

Легкие безтрахеи

80,0
6,1

77,0
5,8

72,0
5,5

80,0
5,7

Тимус

5,0
0,40

6,0
0,32

5,0
0,38

6,0
0,43

Печень

345,0
27,7

350,0
25,3

310,0
23,8

340,0
24,3

Селезенка

72,0
5,1

68,0
4,3

80,0
4,2

90,0
4,4

Почка (лев.)

17,6
1,13

17,4
1,16

18,0
1,18

21,0
1,21

Надпочечник(лев.)

1,4
0,1

1,5
0,1

1,4
0,1

1,5
0,1

Головной мозг

58,6
3,8

58,5
4,2

58,0
4,4

60,0
4,3

Яички илияичники

8,21
0,54

1,6
0,08

8,20
0,63

1,20
0,08

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенные экспериментальныеисследования показали, что препарат «WN-криомелт» при остром введении экспериментальным животным(мышам, крысам, собакам) практически не оказывает токсического действия. Обэтом свидетельствуют следующие экспериментальные данные:
• Уровни летальных доз препарата «WN-криомелт» для беспородных белых мышейи крыс обоего пола при в/м введении находятся заведомо выше 30 мл/кг, а при п/овведении — 42 мл/кг, что в сотни раз больше максимальной суточной дозы 1.0 мл pro dosi(0.02 мл/кг) для человека;
• Препарат «WN-криомелт» при его остром введении вмаксимально возможных (по естественным причинам) дозах беспородным белым крысами собакам обоего пола не приводил к гибели животных, не вызывалмакроскопических изменений головного мозга, внутренних и эндокринных органовживотных, не вызывал гиперволемического отека внутренних органов, чтоподтверждается
величинами их массовых коэффициентов;
• В острых экспериментах по применениюпрепарата «WN-криомелт»не отмечалось признаков, свидетельствующих о раздражающем действии препарата в местевведения.
Таким образом, результатытоксикометрии, данные наблюдений за экспериментальными животными в периодепосле острого применения, а также данные патоморфилогических исследованийпозволяют отнести препарат «WN-криомелт» к V классу практически нетоксичных лекарственныхвеществ (Н. Ноdgееt al.Clinical Toxicology of Commercial Products. Ed. IV, Ваltimorе, 1975, 427 р.; К.К. Сидоров, 1973). Состояние переживших острыеэксперименты животных свидетельствует о хорошей переносимости и безвредностипрепарата в дозах, превышающих максимальные терапевтические в сотни раз.
Проведенные исследованиясвидетельствуют об отсутствии противопоказаний по показателям остройтоксичности для клинических испытаний или медицинского применения препарата «WN-криомелт».
ЛИТЕРАТУРА
1. Бейли Н. Статистическиеметоды в биологии. М., «Мир», 1963, 271 стр.
2. Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активныхвеществ. М., «Медицина», 1974, 143 стр.
3. Правила доклинической оценкибезопасности фармакологических средств (GLP).РД 64-126-91. М., МЗ России, ФК, 1992,45 стр.
4. Проблемы нормы в токсикологии (Подред. проф. И.М. Трахтенберга). М., «Медицина», 1991, 203 стр.
5. Прозоровский В.Б.,Прозоровском М, Демченко В.М. Экспресс-метод определения среднейэффективной дозы и ее ошибки — Фармакол. и токсикол., 1978, 4, 497-502.
6. Руководящие методические материалы по экспериментальномуи клиническому изучению новых лекарственных средств (Официальное издание).Части 1,3. Фармакологический комитет. М., 1975,1981.
7. Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии. М.,«Медицина», 1977, 240 стр.
8. Требования к доклиническому изучению общетоксическогодействия новых фармакологических веществ (временные методически рекомендации).М., МЗ СССР, ФК.1985, 19стр.